Определение подвижных паразитов в фекалиях у собак и кошек
В мазках из фекалий определяют подвижных паразитов. Обычно их приготовляют из жидких или слизистых образцов. Фекалии должны быть как можно более свежими.
Методика
1. Нанесите каплю солевого раствора на чистое предметное стекло.
2. Возьмите пробу кала из прямой кишки пальцем в резиновой перчатке (или дотроньтесь пальцем до уже отобранного свежего образца).
3. Нанесите очень тонким слоем на чистое стекло и накройте покровным стеклом.
4. Просмотрите под микроскопом; освещение не должно быть очень ярким, так как большинство неокрашенных паразитов прозрачные.
Примечания
Высушенные мазки можно окрасить красителями Циля-Нильсена или карболовым фуксином.
К сожалению, отрицательные результаты неубедительны; если при исследовании всех образцов получены отрицательные результаты, необходимо повторное исследование другими методами, например, флотации в растворе сульфата цинка или центрифугирования. Идентификация яиц паразитов несложна с помощью соответствующих справочников. Определение личинок паразитов гораздо сложнее, лучше проконсультироваться с опытным паразитологом или воспользоваться авторитетным справочником.
Cryptosporidium parvum можно определить с помощью модифицированного метода окраски по Цилю-Нильсену; а также флуоресцентным методом.
Флуоресцентный метод. Методика
1. Высушите мазки из фекалий на воздухе и зафиксируйте этанолом.
2. Поместите в формалин и инкубируйте 20 минут при комнатной температуре.
3. Покрасьте фенол/аурамином (0,03 г аурамина, 3,0 г фенола, дистиллированная вода до 100 мл) в течение 10 минут.
4. Смойте водой.
5. Обесцветьте 1%-ным раствором соляной кислоты в 70%-ном денатурате в течение 5 минут.
6. Покрасьте 0,01%-ным синим Эванса в течение 30 секунд.
Микроскопируйте под ультрафиолетовым светом для обнаружения флуоресцирующих криптоспоридий.